概述

• 定义：由布鲁氏菌引发的人畜共患乙类传染病
• 传播途径：接触感染动物、食用污染动物制品，经消化道、皮肤、黏膜和呼吸道传播
• 病原菌：羊种、猪种和牛种布鲁氏菌是主要病原菌
• 潜伏期：1 - 3周
• 临床表现：发热、乏力、关节痛、骨关节病变等，淋巴结、肝脏和脾脏肿大
• 诊断挑战：流行病学认识不足、临床表现多样、检测技术普及率低、方法选择难、标本采集保存问题、生物安全要求待提高

共识基本信息

• 发起机构：新疆医学会微生物学与免疫学专业委员会、新疆医学会检验专业委员会
• 专家组成员：24位相关领域专家
• 启动时间：2024年4月
• 定稿时间：2025年2月
• 适用范围：各类医疗机构临床实验室及相关科室

流行病学特点

• 全球情况：在170多个国家和地区流行，每年报告约50万例，暴露风险人群约24亿
• 中国情况：20世纪50 - 60年代广泛传播，接种疫苗后感染率下降但不稳定，90年代中期再次流行，发病率增加、流行区域变迁
• 新疆情况：2016 - 2020年共报告约23045例，主要分布在伊犁、昌吉等地，病例数逐年下降，春夏为发病高峰期，农民和牧民是高危职业，男性发病率高，非职业及低龄人群发病率增长

病原学特点

• 形态特征：革兰阴性短杆状细胞内寄生菌，初次分离呈球形、杆形及卵圆形，传代后为短小杆状，无鞭毛、芽孢，光滑型菌株有微小荚膜，细胞壁有内、外2层膜，外膜含脂多糖、外膜蛋白及磷脂层
• 分类学情况：兼性细胞内寄生的革兰阴性细菌，分为6个种19个型，还有6个新菌种，羊种最常见，其次是牛种
• 基因特征及分型：基因组平均大小3.3 Mb，由2条环状DNA染色体组成，GC含量约57%，编码3200 - 3400个可读框
• 关键抗原：M抗原（羊种）和A抗原（牛种），含量比例因菌种而异
• 毒力特征：通过LPS、OMP、IV型分泌系统、双组分调控系统等发挥作用，不同种型菌株毒力有差异
• 培养特性：生长速率缓慢，营养要求严格，最适生长温度35 - 37℃，pH值6.6 - 6.8，培养48h后形成微小、透明无色光滑型菌落，可转变为粗糙型菌落，血琼脂平板上不溶血，液体培养液中有轻微混浊和沉淀
• 存活时间：在自然环境中生命力较强，在牛羊乳及乳制品、皮毛中可长时间存活，对常用物理消毒方法和化学消毒剂敏感
• 致病性：不产生外毒素，主要致病物质是LPS、IV型分泌系统、OPM、环状β - 葡聚糖，通过侵入宿主细胞在细胞内寄生，羊种致病力最强，猪种次之，牛种较弱

实验室检测

标本采集、保存及转运

• 血液标本：全血用于血培养，在寒战或发热初期采集，已用药者停药6 - 8h后或下次用药前采集；血清（血浆）标本为首选，采集不少于3mL并及时分离
• 其他标本：骨髓、脓液、组织、脑脊液、关节液、尿液等，严格无菌操作采集，密封送检，甲醛固定石蜡包埋组织在保证DNA提取质量时可用于检测
• 标本保存及转运：标本宜2h内送检，超过2h冷藏转运；用于细菌培养的标本室温保存不超24h，血培养标本不可冷藏；仅用于分子诊断的标本宜冷藏或 - 70℃以下冷冻，避免反复冻融

细菌培养

• 诊断价值：培养出布鲁氏菌是“金标准”，用于确诊，可早期诊断急性布病
• 检测方法：常用哥伦比亚血琼脂平板培养法、Ruiz - Castaneda双相培养法和新型自动化培养系统等
• 操作要求：根据形态学和生化特性识别可疑菌落，操作难度大，易感染，需在二级及以上生物安全柜内严格无菌操作

分子生物学检测

• 核酸扩增试验（NAAT）
  • 检测方法：PCR、PCR - 酶免疫分析法、RT - PCR、M - RT - PCR、巢式PCR、ddPCR、LAMP、RPA技术、CRISPR等
  • 诊断意义：对血清学阴性但有症状患者有重要诊断意义，结果需结合临床表现和流行病学背景分析
• LAMP
  • 特点：检测效率高，成本中等，操作简便，适合基层单位
  • 性能：准确度、特异度和灵敏度均超90%，稳定性强，对抑制物耐受性优于PCR
• mNGS
  • 应用场景：作为其他常规检测阴性时的补充检测手段
  • 诊断价值：对神经型布鲁氏菌和布鲁氏菌性脊柱炎有诊断意义

血清学检测

• 虎红平板凝集试验（RBPT）
  • 适用于现场快速筛查
  • 阳性需进一步验证
• 标准试管凝集试验（SAT）
  • 确诊试验
  • 大样本筛查有优势
  • 复杂和慢性病例假阴性率高
• 酶联免疫吸附试验（ELISA）
  • 复杂、局灶性和慢性病例首选
  • 可用于流行病学调查
  • 可能出现假阴性和假阳性
• Coombs凝胶试验
  • 用于复发和慢性布病诊断
  • 可检测阻断和非凝集抗体
• 胶体金免疫层析试验（GICA）
  • 适用于现场快速初筛
  • 可能出现钩状效应
• 荧光偏振检测（FPA）
  • 国际贸易推荐
  • 适用于大规模筛查
• 补体结合试验（CFT）
  • 国际公认血清学诊断技术
  • 适用于慢性感染和流行病学调查

其他技术

• 人工智能技术
  • 筛查平台和智能识别系统有应用
  • 缺乏文献报道
• 蛋白短肽复合芯片技术（PPHM）
  • 高灵敏度与特异度
  • 有望在布病领域突破

实验室假阴性结果及解决方案

• 检测时间过早：2 - 3周后复查
• 前带效应：血清稀释至1:320以上
• 阻断/不完全抗体：Coombs凝胶试验
• 犬布鲁氏菌感染：种属特异性检测
• 低亲和力抗体：调节稀释剂pH值至5.0

布病临床分期与实验室检查监测评估

临床分期

• 潜伏期
  • 1 - 3周
  • 无明显症状
  • 利于高风险暴露后观察和检测
• 急性期
  • 病程3个月以内
  • 弛张热或波浪热、多汗等症状
  • 血清学检测阳性
• 亚急性期
  • 病程3 - 6个月
  • 症状减轻
  • 结合病程和血清学检测诊断
• 慢性期
  • 病程超过6个月
  • 长期低热、关节酸痛等症状
  • 需结合多种检查综合判断

实验室检查监测评估

• 急性期（含亚急性期）
  • 血培养、SAT、CRP等检测
  • 推荐检测细胞因子和淋巴细胞亚群
• 慢性期
  • 血培养、CRP等检测
  • 推荐检测细胞因子和淋巴细胞亚群

生物安全要求

生物安全实验室

• BSL - 3：活菌和动物感染实验
• BSL - 2：标本检测，弱毒株或疫苗株操作
• BSL - 1：非感染性材料实验

实验室安全设备

• 生物安全柜
• 消毒设备
• 个人防护装备

实验室人员防护

• 穿戴个人防护装备
• 接受生物安全培训

实验室标本保护

• 防止交叉污染和泄漏
• 正确包装和运输
• 建立标本管理流程

患者教育与管理

• 心理疏导
  • 鼓励交流
  • 指导家属理解患者
• 健康宣教
  • 科普疾病知识
  • 解释治疗原则
  • 介绍不良反应
  • 提供生活方式指导
• 随访管理
  • 治疗期间每2 - 4周复查
  • 治疗结束后随访3 - 6个月
• 建立患者档案
  • 记录基本信息和诊疗情况
  • 便于长期管理和个性化治疗

防控策略与建议

• 特定职业人群防控
  • 知识讲座和宣传
  • 推广个人防护装备
  • 定期检测牲畜
  • 及时发现和报告疫情
• 提高诊断准确率
  • 加强临床医师技能培训
  • 加强实验室检测技术培训